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Cy3-Transferrin,Cy3-TF,CY3標(biāo)記的轉(zhuǎn)鐵蛋白的合成步驟概述
CY3標(biāo)記轉(zhuǎn)鐵蛋白的合成通?;贑y3染料的活性酯(如NHS酯)與轉(zhuǎn)鐵蛋白表面游離的賴氨酸氨基發(fā)生共價(jià)反應(yīng)。首先,將純化的轉(zhuǎn)鐵蛋白溶解于適宜的緩沖液中,pH一般調(diào)整至7.5-8.5,以保證賴氨酸氨基的親核性。
隨后,溶解于有機(jī)溶劑(如DMSO)中的Cy3-NHS酯被緩慢加入蛋白溶液中,反應(yīng)體系在室溫或低溫條件下緩慢攪拌。反應(yīng)時(shí)間多控制在2至6小時(shí),期間保持避光以防止染料光降解。
反應(yīng)中,Cy3-NHS酯通過親核攻擊賴氨酸氨基形成酰胺鍵,實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定的共價(jià)連接。該過程需控制染料與蛋白的摩爾比,避免過度標(biāo)記造成蛋白構(gòu)象改變或活性損失。
反應(yīng)結(jié)束后,通過透析、凝膠過濾或超濾方法去除未結(jié)合的游離染料及副產(chǎn)物,獲得純凈的CY3-轉(zhuǎn)鐵蛋白標(biāo)記產(chǎn)物。純化過程注重溫和條件,防止蛋白變性。
終產(chǎn)物經(jīng)過吸光度和熒光光譜檢測(cè)確認(rèn)標(biāo)記成功。該標(biāo)記方法保持轉(zhuǎn)鐵蛋白的鐵結(jié)合能力和受體識(shí)別功能,為后續(xù)生物學(xué)應(yīng)用提供基礎(chǔ)。
產(chǎn)品名稱:Cy3-Transferrin
純度:95%+
規(guī)格:mg/g
用途:科研
CY3標(biāo)記轉(zhuǎn)鐵蛋白的合成通?;贑y3染料的活性酯(如NHS酯)與轉(zhuǎn)鐵蛋白表面游離的賴氨酸氨基發(fā)生共價(jià)反應(yīng)。首先,將純化的轉(zhuǎn)鐵蛋白溶解于適宜的緩沖液中,pH一般調(diào)整至7.5-8.5,以保證賴氨酸氨基的親核性。
隨后,溶解于有機(jī)溶劑(如DMSO)中的Cy3-NHS酯被緩慢加入蛋白溶液中,反應(yīng)體系在室溫或低溫條件下緩慢攪拌。反應(yīng)時(shí)間多控制在2至6小時(shí),期間保持避光以防止染料光降解。
反應(yīng)中,Cy3-NHS酯通過親核攻擊賴氨酸氨基形成酰胺鍵,實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定的共價(jià)連接。該過程需控制染料與蛋白的摩爾比,避免過度標(biāo)記造成蛋白構(gòu)象改變或活性損失。
反應(yīng)結(jié)束后,通過透析、凝膠過濾或超濾方法去除未結(jié)合的游離染料及副產(chǎn)物,獲得純凈的CY3-轉(zhuǎn)鐵蛋白標(biāo)記產(chǎn)物。純化過程注重溫和條件,防止蛋白變性。
終產(chǎn)物經(jīng)過吸光度和熒光光譜檢測(cè)確認(rèn)標(biāo)記成功。該標(biāo)記方法保持轉(zhuǎn)鐵蛋白的鐵結(jié)合能力和受體識(shí)別功能,為后續(xù)生物學(xué)應(yīng)用提供基礎(chǔ)。
產(chǎn)品名稱:Cy3-Transferrin
純度:95%+
規(guī)格:mg/g
用途:科研
狀態(tài):固體/粉末/溶液
推薦產(chǎn)品:
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