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CY3-TF,CY3標(biāo)記的轉(zhuǎn)鐵蛋白的化學(xué)反應(yīng)原理
CY3標(biāo)記轉(zhuǎn)鐵蛋白的化學(xué)反應(yīng)原理主要依賴于Cy3熒光染料中NHS酯基團(tuán)的活性。NHS酯作為一種常用的活性酯,能與蛋白質(zhì)中的游離胺基形成穩(wěn)定的酰胺鍵。
轉(zhuǎn)鐵蛋白分子表面存在多個(gè)賴氨酸殘基,含有可作為親核試劑的氨基。在適宜的緩沖條件下,通常pH 7.5至8.5范圍內(nèi),賴氨酸氨基保持未質(zhì)子化狀態(tài),具備較強(qiáng)的親核性,能夠攻擊NHS酯的碳酰基,推動(dòng)酰胺鍵形成。
該反應(yīng)過程伴隨著N-羥基琥珀酰亞胺的離去,形成穩(wěn)定的共價(jià)鍵,連接Cy3染料與蛋白分子。反應(yīng)溫和,通常在室溫或4℃進(jìn)行,反應(yīng)時(shí)間控制在數(shù)小時(shí)內(nèi),以兼顧反應(yīng)效率和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性。
該標(biāo)記過程的關(guān)鍵是避免非特異性反應(yīng)及蛋白質(zhì)變性,因而需要優(yōu)化緩沖液成分、pH值及反應(yīng)時(shí)間。部分反應(yīng)體系中添加適量的有機(jī)溶劑,如DMSO,能夠提高Cy3-NHS的溶解度,增強(qiáng)反應(yīng)效率。
完成反應(yīng)后,游離的Cy3-NHS酯及副產(chǎn)物通過透析、凝膠過濾等方法去除,獲得純凈的Cy3-轉(zhuǎn)鐵蛋白標(biāo)記物。反應(yīng)后產(chǎn)物在熒光光譜中顯示典型的激發(fā)與發(fā)射峰,證實(shí)標(biāo)記成功。
該共價(jià)偶聯(lián)反應(yīng)不僅保證標(biāo)記的牢固性,還確保了轉(zhuǎn)鐵蛋白的結(jié)構(gòu)和功能基本保持完整,適合后續(xù)的生物化學(xué)及細(xì)胞學(xué)研究。
產(chǎn)品名稱:CY3-TF,CY3標(biāo)記的轉(zhuǎn)鐵蛋白
純度:95%+
規(guī)格:mg/g
用途:科研
CY5標(biāo)記的氯苯丁酯 Cy5-Chlorambucil
CY5標(biāo)記的氯磺隆類似物 Cy5-Chlorsulfuron-analogue
CY5標(biāo)記的氯霉素 Cy5-chloramphenicol
CY5標(biāo)記的馬兜鈴酸 Cy5-Aristolochic-Acid
CY3標(biāo)記轉(zhuǎn)鐵蛋白的化學(xué)反應(yīng)原理主要依賴于Cy3熒光染料中NHS酯基團(tuán)的活性。NHS酯作為一種常用的活性酯,能與蛋白質(zhì)中的游離胺基形成穩(wěn)定的酰胺鍵。
轉(zhuǎn)鐵蛋白分子表面存在多個(gè)賴氨酸殘基,含有可作為親核試劑的氨基。在適宜的緩沖條件下,通常pH 7.5至8.5范圍內(nèi),賴氨酸氨基保持未質(zhì)子化狀態(tài),具備較強(qiáng)的親核性,能夠攻擊NHS酯的碳酰基,推動(dòng)酰胺鍵形成。
該反應(yīng)過程伴隨著N-羥基琥珀酰亞胺的離去,形成穩(wěn)定的共價(jià)鍵,連接Cy3染料與蛋白分子。反應(yīng)溫和,通常在室溫或4℃進(jìn)行,反應(yīng)時(shí)間控制在數(shù)小時(shí)內(nèi),以兼顧反應(yīng)效率和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性。
該標(biāo)記過程的關(guān)鍵是避免非特異性反應(yīng)及蛋白質(zhì)變性,因而需要優(yōu)化緩沖液成分、pH值及反應(yīng)時(shí)間。部分反應(yīng)體系中添加適量的有機(jī)溶劑,如DMSO,能夠提高Cy3-NHS的溶解度,增強(qiáng)反應(yīng)效率。
完成反應(yīng)后,游離的Cy3-NHS酯及副產(chǎn)物通過透析、凝膠過濾等方法去除,獲得純凈的Cy3-轉(zhuǎn)鐵蛋白標(biāo)記物。反應(yīng)后產(chǎn)物在熒光光譜中顯示典型的激發(fā)與發(fā)射峰,證實(shí)標(biāo)記成功。
該共價(jià)偶聯(lián)反應(yīng)不僅保證標(biāo)記的牢固性,還確保了轉(zhuǎn)鐵蛋白的結(jié)構(gòu)和功能基本保持完整,適合后續(xù)的生物化學(xué)及細(xì)胞學(xué)研究。
產(chǎn)品名稱:CY3-TF,CY3標(biāo)記的轉(zhuǎn)鐵蛋白
純度:95%+
規(guī)格:mg/g
用途:科研
狀態(tài):固體/粉末/溶液
CY5標(biāo)記的氯苯丁酯 Cy5-Chlorambucil
CY5標(biāo)記的氯磺隆類似物 Cy5-Chlorsulfuron-analogue
CY5標(biāo)記的氯霉素 Cy5-chloramphenicol
CY5標(biāo)記的馬兜鈴酸 Cy5-Aristolochic-Acid
CY5標(biāo)記的馬賽替尼 Cy5-Masitinib
僅用于科研,不能用于人體。小編axc
序號(hào) | 新聞標(biāo)題 | 瀏覽次數(shù) | 作者 | 發(fā)布時(shí)間 |
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5 | 瑞禧ROS響應(yīng)性定制: DSPE-TK-PEO ;DBCO-SS-COOH/MAL科研 | 1135 | 瑞禧生物 | 2022-12-08 |
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