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Cy3-labeled載脂蛋白B,ApoB,CY3標(biāo)記的載脂蛋白B的合成步驟
載脂蛋白B(Apolipoprotein B,簡稱ApoB)是一種大型脂蛋白分子,分子量約為550 kDa,結(jié)構(gòu)復(fù)雜,富含賴氨酸和精氨酸殘基。將熒光染料CY3標(biāo)記于ApoB分子上,有助于研究其分布、動力學(xué)及脂質(zhì)結(jié)合特性。
合成Cy3-labeled ApoB的步驟通常從蛋白的溶解開始。純化的ApoB首先溶解于適當(dāng)?shù)木彌_液中,如碳酸鹽緩沖液(pH 8.0-8.5)或PBS(pH 7.4),濃度控制在0.5-2 mg/mL,以確保蛋白處于穩(wěn)定狀態(tài)。
熒光染料CY3以NHS酯形式儲存,需溶于無水有機溶劑(如DMSO)以保持活性。將CY3-NHS溶液緩慢滴加至ApoB溶液中,保持緩慢攪拌,反應(yīng)溫度一般控制在室溫至4°C,避免蛋白變性。染料與蛋白的摩爾比通常根據(jù)需求設(shè)定,常見范圍為5:1至20:1。
反應(yīng)時間通常為1至3小時,pH條件適宜可促進NHS酯與蛋白賴氨酸側(cè)鏈氨基的酰胺鍵形成,確保標(biāo)記穩(wěn)定性。反應(yīng)完成后,采用透析、凝膠過濾或超濾方法去除游離的未結(jié)合染料。
純化后的Cy3-ApoB通過紫外-可見光光譜和熒光光譜檢測確認標(biāo)記成功,同時可進行SDS-PAGE等技術(shù)驗證蛋白完整性。標(biāo)記產(chǎn)物在保持ApoB結(jié)構(gòu)和功能的基礎(chǔ)上,表現(xiàn)出穩(wěn)定的熒光性質(zhì),適合于細胞攝取、脂質(zhì)代謝及蛋白質(zhì)互作研究。
產(chǎn)品名稱:Cy3-labeled載脂蛋白B
純度:95%+
規(guī)格:mg/g
用途:科研
載脂蛋白B(Apolipoprotein B,簡稱ApoB)是一種大型脂蛋白分子,分子量約為550 kDa,結(jié)構(gòu)復(fù)雜,富含賴氨酸和精氨酸殘基。將熒光染料CY3標(biāo)記于ApoB分子上,有助于研究其分布、動力學(xué)及脂質(zhì)結(jié)合特性。
合成Cy3-labeled ApoB的步驟通常從蛋白的溶解開始。純化的ApoB首先溶解于適當(dāng)?shù)木彌_液中,如碳酸鹽緩沖液(pH 8.0-8.5)或PBS(pH 7.4),濃度控制在0.5-2 mg/mL,以確保蛋白處于穩(wěn)定狀態(tài)。
熒光染料CY3以NHS酯形式儲存,需溶于無水有機溶劑(如DMSO)以保持活性。將CY3-NHS溶液緩慢滴加至ApoB溶液中,保持緩慢攪拌,反應(yīng)溫度一般控制在室溫至4°C,避免蛋白變性。染料與蛋白的摩爾比通常根據(jù)需求設(shè)定,常見范圍為5:1至20:1。
反應(yīng)時間通常為1至3小時,pH條件適宜可促進NHS酯與蛋白賴氨酸側(cè)鏈氨基的酰胺鍵形成,確保標(biāo)記穩(wěn)定性。反應(yīng)完成后,采用透析、凝膠過濾或超濾方法去除游離的未結(jié)合染料。
純化后的Cy3-ApoB通過紫外-可見光光譜和熒光光譜檢測確認標(biāo)記成功,同時可進行SDS-PAGE等技術(shù)驗證蛋白完整性。標(biāo)記產(chǎn)物在保持ApoB結(jié)構(gòu)和功能的基礎(chǔ)上,表現(xiàn)出穩(wěn)定的熒光性質(zhì),適合于細胞攝取、脂質(zhì)代謝及蛋白質(zhì)互作研究。
產(chǎn)品名稱:Cy3-labeled載脂蛋白B
純度:95%+
規(guī)格:mg/g
用途:科研
狀態(tài):固體/粉末/溶液
推薦產(chǎn)品:
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