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Cy3-labeled載脂蛋白A1,CY3標(biāo)記的載脂蛋白A1的合成路線
載脂蛋白A1(Apolipoprotein A1,ApoA1)是血漿中主要的高密度脂蛋白成分,分子量約為28 kDa,由243個(gè)氨基酸殘基組成。通過(guò)CY3熒光染料對(duì)ApoA1的標(biāo)記,便于研究其結(jié)構(gòu)、動(dòng)力學(xué)及與脂質(zhì)的相互作用。
合成CY3-labeled ApoA1的路線主要包含蛋白的溶解、標(biāo)記反應(yīng)及純化步驟。首先,純化的ApoA1蛋白溶解于適宜緩沖液(如PBS或碳酸鹽緩沖液,pH 7.4-8.5),濃度一般控制在1-5 mg/mL,以保證蛋白處于穩(wěn)定溶解狀態(tài)。
熒光染料CY3以其NHS酯形式制備,溶于無(wú)水有機(jī)溶劑(如DMSO),以避免水解。將CY3-NHS酯緩慢滴加至蛋白溶液中,摩爾比一般控制在1:10至1:50(染料:蛋白),并保持反應(yīng)體系輕柔混合。反應(yīng)在4°C至室溫下進(jìn)行1至3小時(shí),避免蛋白質(zhì)變性及非特異性反應(yīng)。
標(biāo)記過(guò)程中,CY3的NHS酯活性基團(tuán)與ApoA1分子表面的賴氨酸側(cè)鏈氨基反應(yīng),形成穩(wěn)定的酰胺鍵。此過(guò)程需保持緩沖體系的pH適中,確保氨基親核性,同時(shí)保護(hù)蛋白的三級(jí)結(jié)構(gòu)。
反應(yīng)結(jié)束后,通過(guò)透析、凝膠過(guò)濾或超濾技術(shù)去除未結(jié)合的游離染料,確保標(biāo)記產(chǎn)物的純度。純化后的CY3-ApoA1在紫外-可見(jiàn)光譜儀中表現(xiàn)出特征性的吸收峰和熒光峰,證明標(biāo)記成功。
該標(biāo)記蛋白能維持其構(gòu)象和功能,適合用于脂蛋白復(fù)合物組裝、脂質(zhì)結(jié)合和受體相互作用的研究。合成路線簡(jiǎn)單且適應(yīng)性強(qiáng),便于大規(guī)模制備與后續(xù)多樣化應(yīng)用。
產(chǎn)品名稱:Cy3-labeled載脂蛋白A1
純度:95%+
規(guī)格:mg/g
用途:科研
CY5標(biāo)記的刀豆蛋白A Cy5-ConcanavalinA 花菁染料CY5-刀豆球蛋白A
CY5標(biāo)記的地塞米松 Cy5-Dexamethasone
CY5標(biāo)記的多聚半乳糖酸 Cy5-Polygalacic-Acid
CY5標(biāo)記的多維替尼 Cy5-Dovitinib
載脂蛋白A1(Apolipoprotein A1,ApoA1)是血漿中主要的高密度脂蛋白成分,分子量約為28 kDa,由243個(gè)氨基酸殘基組成。通過(guò)CY3熒光染料對(duì)ApoA1的標(biāo)記,便于研究其結(jié)構(gòu)、動(dòng)力學(xué)及與脂質(zhì)的相互作用。
合成CY3-labeled ApoA1的路線主要包含蛋白的溶解、標(biāo)記反應(yīng)及純化步驟。首先,純化的ApoA1蛋白溶解于適宜緩沖液(如PBS或碳酸鹽緩沖液,pH 7.4-8.5),濃度一般控制在1-5 mg/mL,以保證蛋白處于穩(wěn)定溶解狀態(tài)。
熒光染料CY3以其NHS酯形式制備,溶于無(wú)水有機(jī)溶劑(如DMSO),以避免水解。將CY3-NHS酯緩慢滴加至蛋白溶液中,摩爾比一般控制在1:10至1:50(染料:蛋白),并保持反應(yīng)體系輕柔混合。反應(yīng)在4°C至室溫下進(jìn)行1至3小時(shí),避免蛋白質(zhì)變性及非特異性反應(yīng)。
標(biāo)記過(guò)程中,CY3的NHS酯活性基團(tuán)與ApoA1分子表面的賴氨酸側(cè)鏈氨基反應(yīng),形成穩(wěn)定的酰胺鍵。此過(guò)程需保持緩沖體系的pH適中,確保氨基親核性,同時(shí)保護(hù)蛋白的三級(jí)結(jié)構(gòu)。
反應(yīng)結(jié)束后,通過(guò)透析、凝膠過(guò)濾或超濾技術(shù)去除未結(jié)合的游離染料,確保標(biāo)記產(chǎn)物的純度。純化后的CY3-ApoA1在紫外-可見(jiàn)光譜儀中表現(xiàn)出特征性的吸收峰和熒光峰,證明標(biāo)記成功。
該標(biāo)記蛋白能維持其構(gòu)象和功能,適合用于脂蛋白復(fù)合物組裝、脂質(zhì)結(jié)合和受體相互作用的研究。合成路線簡(jiǎn)單且適應(yīng)性強(qiáng),便于大規(guī)模制備與后續(xù)多樣化應(yīng)用。
產(chǎn)品名稱:Cy3-labeled載脂蛋白A1
純度:95%+
規(guī)格:mg/g
用途:科研
狀態(tài):固體/粉末/溶液
CY5標(biāo)記的刀豆蛋白A Cy5-ConcanavalinA 花菁染料CY5-刀豆球蛋白A
CY5標(biāo)記的地塞米松 Cy5-Dexamethasone
CY5標(biāo)記的多聚半乳糖酸 Cy5-Polygalacic-Acid
CY5標(biāo)記的多維替尼 Cy5-Dovitinib
CY5標(biāo)記的厄洛替尼 Cy5-Erlotinib
僅用于科研,不能用于人體。小編axc
序號(hào) | 新聞標(biāo)題 | 瀏覽次數(shù) | 作者 | 發(fā)布時(shí)間 |
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5 | 瑞禧ROS響應(yīng)性定制: DSPE-TK-PEO ;DBCO-SS-COOH/MAL科研 | 1144 | 瑞禧生物 | 2022-12-08 |
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7 | 2022瑞禧 可選分子量 PCL-TK-PEI-DOX/FA 聚已內(nèi)酯響應(yīng)性 | 923 | 瑞禧生物 | 2022-12-08 |