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CY5-DSPE,CY5標記的二硬脂?;字R掖及?nbsp;
Cy5-DSPE 是通過將DSPE與Cyanine5偶聯(lián)形成的熒光脂質(zhì)分子,其合成與純化過程關(guān)鍵在于保持脂質(zhì)疏水尾鏈結(jié)構(gòu)完整、熒光標記活性及水相自組裝能力。
合成步驟:
原料準備——將DSPE溶解于少量有機溶劑(如DMSO、DMF)中,保持氨基活性,避免脂質(zhì)尾鏈聚集。Cy5-NHS酯或Cy5碳酸酯溶解于同類有機溶劑備用。
偶聯(lián)反應——在弱堿性緩沖體系(pH 7.5–8.5)中,加入Cy5溶液至DSPE體系,輕輕攪拌。偶聯(lián)通過氨基對活化酯的親核攻擊形成酰胺鍵,完成Cy5分子與DSPE頭基共價結(jié)合。反應溫度控制在室溫,時間2–12小時,以平衡偶聯(lián)效率與分子穩(wěn)定性。
反應終止——反應完成后,可通過稀釋緩沖液或調(diào)節(jié)pH至中性終止反應,防止過度副反應。
純化步驟:
初步去除未反應染料——利用透析或超濾膜(MWCO適配DSPE分子量)去除自由Cy5分子及小分子副產(chǎn)物。
高效液相色譜(HPLC)精制——采用反相HPLC分離偶聯(lián)產(chǎn)物,利用疏水尾鏈與C18柱的親和力區(qū)分未偶聯(lián)DSPE及多余Cy5,實現(xiàn)高純度Cy5-DSPE分離。
產(chǎn)物驗證——質(zhì)譜(MS)確認分子量及偶聯(lián)情況,核磁共振(NMR)分析頭基結(jié)構(gòu)與酰胺鍵形成,紫外/熒光光譜測定熒光特性及偶聯(lián)效率。
儲存與穩(wěn)定性——純化后的Cy5-DSPE可在緩沖液或干粉條件下低溫儲存,保持脂質(zhì)尾鏈結(jié)構(gòu)、熒光活性及水相自組裝能力,適用于脂質(zhì)體標記及生物膜研究。
產(chǎn)品名稱:CY5-DSPE,CY5標記的二硬脂?;字R掖及?nbsp;
純度:95%+
規(guī)格:mg/g
用途:科研
Cy5-DSPE 是通過將DSPE與Cyanine5偶聯(lián)形成的熒光脂質(zhì)分子,其合成與純化過程關(guān)鍵在于保持脂質(zhì)疏水尾鏈結(jié)構(gòu)完整、熒光標記活性及水相自組裝能力。
合成步驟:
原料準備——將DSPE溶解于少量有機溶劑(如DMSO、DMF)中,保持氨基活性,避免脂質(zhì)尾鏈聚集。Cy5-NHS酯或Cy5碳酸酯溶解于同類有機溶劑備用。
偶聯(lián)反應——在弱堿性緩沖體系(pH 7.5–8.5)中,加入Cy5溶液至DSPE體系,輕輕攪拌。偶聯(lián)通過氨基對活化酯的親核攻擊形成酰胺鍵,完成Cy5分子與DSPE頭基共價結(jié)合。反應溫度控制在室溫,時間2–12小時,以平衡偶聯(lián)效率與分子穩(wěn)定性。
反應終止——反應完成后,可通過稀釋緩沖液或調(diào)節(jié)pH至中性終止反應,防止過度副反應。
純化步驟:
初步去除未反應染料——利用透析或超濾膜(MWCO適配DSPE分子量)去除自由Cy5分子及小分子副產(chǎn)物。
高效液相色譜(HPLC)精制——采用反相HPLC分離偶聯(lián)產(chǎn)物,利用疏水尾鏈與C18柱的親和力區(qū)分未偶聯(lián)DSPE及多余Cy5,實現(xiàn)高純度Cy5-DSPE分離。
產(chǎn)物驗證——質(zhì)譜(MS)確認分子量及偶聯(lián)情況,核磁共振(NMR)分析頭基結(jié)構(gòu)與酰胺鍵形成,紫外/熒光光譜測定熒光特性及偶聯(lián)效率。
儲存與穩(wěn)定性——純化后的Cy5-DSPE可在緩沖液或干粉條件下低溫儲存,保持脂質(zhì)尾鏈結(jié)構(gòu)、熒光活性及水相自組裝能力,適用于脂質(zhì)體標記及生物膜研究。
產(chǎn)品名稱:CY5-DSPE,CY5標記的二硬脂?;字R掖及?nbsp;
純度:95%+
規(guī)格:mg/g
用途:科研
狀態(tài):固體/粉末/溶液
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