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產(chǎn)品名稱：Cy5-NH2，花菁染料Cy5-氨基的操作要點(diǎn)
操作要點(diǎn)：高效標(biāo)記與穩(wěn)定性的關(guān)鍵
標(biāo)記前準(zhǔn)備
目標(biāo)分子活化：若標(biāo)記羧基（-COOH），需用EDC/NHS活化生成NHS酯，提高反應(yīng)效率。
pH控制：氨基反應(yīng)通常在弱堿性條件（pH 7.5-8.5）下進(jìn)行，避免氨基質(zhì)子化（pKa≈9-10）降低反應(yīng)活性。
溶劑選擇：優(yōu)先使用DMSO、DMF或PBS緩沖液，避免高極性溶劑（如水）降低反應(yīng)速率。
標(biāo)記反應(yīng)條件
摩爾比：Cy5-NH?與目標(biāo)分子的摩爾比通常為1:1-1:5（過量染料可提高標(biāo)記效率，但需后續(xù)純化）。
反應(yīng)時(shí)間：室溫孵育1-4小時(shí)，或4℃過夜（低溫減少副反應(yīng)）。
避光操作：Cy5對(duì)光敏感，需在暗處或黃光下操作。
純化與驗(yàn)證
純化方法：
透析：MWCO 3500-10000 Da，去除未反應(yīng)的Cy5-NH?（小分子染料）。
凝膠柱層析（如Sephadex G-25）：分離標(biāo)記產(chǎn)物與游離染料。
HPLC：反相C18柱純化，驗(yàn)證標(biāo)記純度（>95%）。
驗(yàn)證方法：
熒光光譜：檢測標(biāo)記產(chǎn)物的吸收/發(fā)射波長是否與Cy5一致。
SDS-PAGE：若標(biāo)記蛋白質(zhì)，通過凝膠電泳驗(yàn)證分子量變化。
質(zhì)譜：測定標(biāo)記產(chǎn)物的分子量，確認(rèn)標(biāo)記位點(diǎn)（如單標(biāo)記或雙標(biāo)記）。
穩(wěn)定性測試
光穩(wěn)定性：標(biāo)記產(chǎn)物在連續(xù)光照（如氙燈）下照射1小時(shí)，熒光強(qiáng)度衰減<10%為合格。
化學(xué)穩(wěn)定性：在PBS或血清中孵育24-48小時(shí)，熒光強(qiáng)度保持>90%為穩(wěn)定。
存儲(chǔ)條件：標(biāo)記產(chǎn)物需避光、干燥保存（-20℃），避免反復(fù)凍融。
溫馨提示：僅用于科研，不能用于人體實(shí)驗(yàn)！wyh
西安瑞禧生物科技有限公司經(jīng)營的產(chǎn)品種類包括有：近紅外熒光染料、點(diǎn)擊化學(xué)產(chǎn)品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性納米顆粒、納米金及納米金棒、活性熒光染料、熒光標(biāo)記的葡聚糖BSA和鏈霉親和素、蛋白交聯(lián)劑、小分子PEG衍生物、樹枝狀聚合物、環(huán)糊精衍生物、大環(huán)配體類、熒光量子點(diǎn)、透明質(zhì)酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳納米管、富勒烯，二氧化硅及介孔二影產(chǎn)品，熒光蛋白及熒光探針等，歡迎咨詢。
我們可以提供的相關(guān)產(chǎn)品）
CY3-MAL 花菁染料CY3-馬來酰亞胺
CY3-HZ,花菁染料CY3-酰肼
CY7.5-NHS ester 花菁染料CY7.5-活性酯
Sulfo CY5-COOH 磺化CY5 羧基
Sulfo CY7-MAL 水溶性花菁染料-馬來酰亞胺
Sulfo-CY3-MAL 磺化CY3-馬來酰亞胺
Sulfo-CY5-MAL 磺化CY5-馬來酰亞胺
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目標(biāo)分子活化：若標(biāo)記羧基（-COOH），需用EDC/NHS活化生成NHS酯，提高反應(yīng)效率。
pH控制：氨基反應(yīng)通常在弱堿性條件（pH 7.5-8.5）下進(jìn)行，避免氨基質(zhì)子化（pKa≈9-10）降低反應(yīng)活性。
溶劑選擇：優(yōu)先使用DMSO、DMF或PBS緩沖液，避免高極性溶劑（如水）降低反應(yīng)速率。
標(biāo)記反應(yīng)條件
摩爾比：Cy5-NH?與目標(biāo)分子的摩爾比通常為1:1-1:5（過量染料可提高標(biāo)記效率，但需后續(xù)純化）。
反應(yīng)時(shí)間：室溫孵育1-4小時(shí)，或4℃過夜（低溫減少副反應(yīng)）。
避光操作：Cy5對(duì)光敏感，需在暗處或黃光下操作。
純化與驗(yàn)證
純化方法：
透析：MWCO 3500-10000 Da，去除未反應(yīng)的Cy5-NH?（小分子染料）。
凝膠柱層析（如Sephadex G-25）：分離標(biāo)記產(chǎn)物與游離染料。
HPLC：反相C18柱純化，驗(yàn)證標(biāo)記純度（>95%）。
驗(yàn)證方法：
熒光光譜：檢測標(biāo)記產(chǎn)物的吸收/發(fā)射波長是否與Cy5一致。
SDS-PAGE：若標(biāo)記蛋白質(zhì)，通過凝膠電泳驗(yàn)證分子量變化。
質(zhì)譜：測定標(biāo)記產(chǎn)物的分子量，確認(rèn)標(biāo)記位點(diǎn)（如單標(biāo)記或雙標(biāo)記）。
穩(wěn)定性測試
光穩(wěn)定性：標(biāo)記產(chǎn)物在連續(xù)光照（如氙燈）下照射1小時(shí)，熒光強(qiáng)度衰減<10%為合格。
化學(xué)穩(wěn)定性：在PBS或血清中孵育24-48小時(shí)，熒光強(qiáng)度保持>90%為穩(wěn)定。
存儲(chǔ)條件：標(biāo)記產(chǎn)物需避光、干燥保存（-20℃），避免反復(fù)凍融。
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